Vedligeholdelse og brugsmetode for ultrafiltreringsrør

Vedligeholdelse og brugsmetode for ultrafiltreringsrør

Funktion af ultrafiltreringsrør:

1) Koncentration; 2) Afsaltning; 3) Udskift buffer; 4) Det har effekten af ​​delvis oprensning.

1. Det nye ultrafiltreringsrør kan bruges direkte uden anden behandling;

2. Ultrafiltreringsrøret kan ikke steriliseres ved høj temperatur;

3. Behandling af ultrafiltreringsrør ved skift af koncentreret protein

Ultrafiltreringsrøret kan genbruges. Læg det i blød i 0.1M NaOH i 1-2 timer, vask det med vand, og vask det derefter med relevant opløsning (steriliseret vand eller PBS) på centrifugen i 3 gange, som kan bruges til at koncentrere nyt protein;

4. Behandling af normalt placeret ultrafiltreringsrør

Til det ofte brugte ultrafiltreringsrør skal du lægge det i blød i 0.1M NaOH i 1-2 timer, vaske det med vand og lægge det i blød i steriliseret vand. Sørg for at holde filtermembranen våd og forhindre bakterier i at vokse;

5. Behandling af ultrafiltreringsrør placeret i lang tid

Hvis ultrafiltreringsrøret ikke bruges i lang tid, skal du lægge det i blød i 0.1M NaOH i 1-2 timer, vaske det med vand og lægge det i blød i 20 procent ethanol til opbevaring. Sørg for at holde filtermembranen våd og forhindre bakterier i at vokse;

6. Centrifugalhastighed brugt til ultrafiltreringsrør

Centrifugalhastigheden er generelt 4000 rpm (3000g anbefales generelt, og maksimum kan ikke overstige 4000g). Efter centrifugering i 5-8 minutter kan 4 ml prøve koncentreres til mindre end 1 ml til snesevis af mikroliter; Hvis hastigheden er for høj, vil målproteinet falde af, hvilket resulterer i tab af målprotein; Lav hastighed, tidskrævende og lav arbejdseffektivitet;

7. Forholdsregler, når pistolhovedet strækker sig ind i ultrafiltreringsrøret

Når der tilsættes proteinopløsning eller buffer til ultrafiltreringsrøret, kan det blå pistolhoved bruges; Men når det koncentrerede målprotein absorberes fra bunden af ​​ultrafiltreringsrøret, skal det gule pistolhoved anvendes; Når pistolhovedet indsættes i ultrafiltreringsrøret, skal det forhindres i at røre ved filtermembranen for at undgå at punktere filtermembranen;

8. Reducer tab af proteinadsorption af ultrafiltreringsrør

Membranen i ultrafiltreringsrøret kan adsorbere protein, hvilket vil reducere målproteinet med omkring 30 procent; For at reducere proteintab, efter at have absorberet målproteinopløsningen, skylles bunden af ​​ultrafiltreringsrøret med proteinbuffer for at vaske det meste af proteinet adsorberet af filtermembranen og reducere tabet af målprotein; Hvis det oprensede protein er koncentreret, skal du være opmærksom på, at det koncentrerede volumen ikke må være for lille; Generelt, uanset hvor centrifugeret, omkring 200 µl proteinopløsning vil blive tilbageholdt i bunden;

9. Sådan defineres fejlen i ultrafiltreringsrøret

Ved normal brug, når filtermembranen ikke er punkteret, indeholder den koncentrerede proteinopløsning ikke protein, eller mængden er meget lav (inklusive målprotein), mens den første filtrerede opløsning indeholder målprotein, indikerer det, at filtermembranen er ugyldig og skal udskiftes med et nyt ultrafiltreringsrør.