Guidling Technology bringer dig til at lære den enkle og effektive metode til afsaltning og koncentration

Proteiner skal ofte afsaltes efter adskillelse og oprensning, og disse salte stammer hovedsageligt fra forskellige ioner i levende organismer (f.eks. natriumioner, kaliumioner, chloridioner osv.) samt buffersalte i ekstrakterne, salte i eluenter og saltkomponenter af visse denatureringsmidler, der anvendes til eksperimenter. Høj koncentration af salt kan påvirke aktiviteten og stabiliteten af ​​proteiner såvel som deres interaktioner med andre molekyler, generere forstyrrende signaler eller reducere nøjagtigheden af ​​målinger i efterfølgende analytiske metoder såsom elektroforese, massespektrometri og krystallografiske undersøgelser. Derfor er det meget nødvendigt at afsalte de oprensede proteiner efter adskillelse, og de vigtigste afsaltningsmetoder, der ofte anvendes, er membran (dialyse og ultrafiltrering) og gelfiltreringskromatografi. Derudover kan afsaltning i nogle tilfælde også opnås ved fortynding.

 

Dialyseafsaltning, på grund af den lange cyklus og behovet for et stort antal erstatningsvæske, er dets anvendelse blevet stærkt begrænset, og det er mindre brugt i industrien, men hovedsagelig delvist brugt i laboratoriet, laboratoriet erstattes også gradvist af ultrafiltreringsrør /ultrafiltreringskop.

 

Den vigtigste membranseparationsteknologi, der anvendes i processen med proteinafsaltning og -koncentration, er ultrafiltrering. Ultrafiltrering er en membranseparationsteknologi med høj effektivitet, lavt energiforbrug, ingen faseændring, intet behov for at tilføje nogen kemiske reagenser, nem betjening, milde forhold, evnen, der bedre kunne opretholde aktiviteten af ​​biologiske makromolekyler, høj genvindingshastighed og andre fordele , og dets anvendelse i proteinseparation og oprensning har unikke fordele.

 

Ultrafiltrering er en membranfiltreringsmetode, der bruger en porøs membran som separationsmedium og er afhængig af trykforskellen mellem de to sider af membranen som drivkraften til at adskille stoffer med forskellig molekylvægt i opløsning, hvilket spiller en rolle i afsaltning, koncentration og rensning. Dette er en ny metode udviklet i de senere år, som er mest velegnet til koncentration eller afsaltning af biologiske makromolekyler, især proteiner og enzymer. Nøglen til anvendelsen af ​​ultrafiltrering er valget af membran, forskellige typer og specifikationer af membranen, har forskellen i vandstrømningshastighed, molekylvægt cut-off og andre parametre, den skal vælges i henhold til de relevante arbejdsbehov. Derudover har formen af ​​ultrafiltreringsanordning, opløst stofs sammensætning og egenskaber, opløsningskoncentration osv. en vis indflydelse på effekten af ​​ultrafiltrering.

 

Anvendelsen af ​​ultrafiltreringsteknologi til afsaltning og koncentrering af proteiner i rensningsprocessen af ​​proteiner er kendetegnet ved dens egnethed til behandling af store mængder væsker fra nogle få hundrede til nogle få tusinde liter med fordelene ved enkel betjening, tidsbesparende og høj proteingenvindingshastighed. Ultrafiltreringsmetoden er modnet fra ultrafiltreringsrør til laboratoriemikrovolumenbehandling, ultrafiltreringskopper til småvolumenbehandling og ultrafiltreringssystemer til industriel brug.

 

Ultrafiltrering er underopdelt i direkte tryk ultrafiltrering og tangentiel flowfiltrering, og på nuværende tidspunkt anvendes tangentiel flowfiltrering hovedsageligt i industrien, som er meget udbredt til afsaltning og bufferudskiftning.

 

Det følgende er et eksempel på anvendelsen af ​​Guidling Technologys ultrafiltreringsmembrankassetter til proteinafsaltning og -koncentrering.

 

Vi brugte en {{0}}.11㎡ 10 kd porestørrelse membrankassette (G01100010K) til at afsalte og koncentrere 500 ml PEG-modificeret væksthormonopløsning i en koncentration på 0,2 mg/ml. Igennem ultrafiltreringsprocessen blev afsaltningshastigheden, proteingenvindingshastigheden, membranfluxsvigttilstanden og vandfluxgenvindingshastigheden undersøgt.

 

Før og efter brugen testede vi vandstrømmen af ​​membrankassetten separat, og genvindingshastigheden for membrankassetterne nåede 98% under forudsætningen af ​​at opretholde samme fødehastighed, fødetryk og tilbagesvalingstryk.

 

Hele processen behandlede i alt 2L materiale og tog 40min., 0-5min var koncentrationsprocessen, 5-35min var væskeudvekslingsprocessen og 35-40min. var overkoncentrationsprocessen. Under hele ultrafiltreringsprocessen blev TMP stabiliseret mellem 0,7-0,8 bar, tilførselshastigheden var konstant, og den gennemsnitlige materialeflux var 27 LMH.

 

2L materiale koncentreret væskeudveksling til 60mL, ca. 33 gange koncentreret, afsaltningshastigheden når op på 99%, genvindingsgraden når op på 80%, efter en vask en stigning på 50mL væske, den samlede genvinding på 88%, industriel produktion iht. dødvolumen af ​​rørledningsberegninger, så vidt muligt for at øge antallet af gange af topvasken, kan generel topvask 3 gange genvindes fuldstændigt.

 

Guidling Technology membrankassetter er lavet af medicinsk kvalitet inerte materialer med stærk korrosionsbestandighed og kan modstå stærk alkalisk rengøring; brugen af ​​automatiseret fremstillingsproces sikrer produktets kontinuitet og kvalitetspålidelighed, højere mekanisk styrke, modstand mod modtryk og gentagen skylleydelse; den har super hydrofilicitet, hvilket kan give membranen højere flux og lavere proteinadsorption; vi har også et optimeret flowkanaldesign med et mindre trykfald, som letter materialeoverførsel og forkorter filtreringstiden markant.

 

Vores membrankassetter fås i en bred vifte af porestørrelser, fra 1kd til 1000kd. Blandt dem kan 1-10kd ultrafiltreringsmembrankassetter bruges til afsaltning og pyrogenfjernelse; 30kd ultrafiltreringsmembrankassetter kan bruges til monoklonalt antistofkoncentration og buffererstatning; samtidig kan vores hulfiberprodukter også bruges til koncentration og erstatning af biologiske stoffer med porestørrelser på 100kd, 300kd og 500kd, som hovedsageligt anvendes til en lang række anvendelser i vaccineprodukter.

 

Guidling Technology er en national højteknologisk virksomhed med fokus på biofarmaceutiske produkter, cellekultur, oprensning og koncentration af biomedicin, diagnose og industrielle væsker. Vi har med succes udviklet centrifugalfilterenheder, ultrafiltrerings- og mikrofiltreringskassetter, virusfilter, TFF-system, dybdefilter, hule fibre osv., som fuldt ud opfylder anvendelsesscenarierne for biofarmaceutika, cellekultur og så videre. Vores membraner og membranfiltre bruges i vid udstrækning til koncentrering, ekstraktion og adskillelse af forfiltrering, mikrofiltrering, ultrafiltrering og nanofiltrering. Vores mange produktlinjer, fra små laboratoriefiltrering til engangsbrug til produktionsfiltreringssystemer, sterilitetstestning, fermentering, cellekultur og mere, opfylder behovene for test og produktion. Guidling Technology ser frem til at samarbejde med dig!