Faktorer, der påvirker virusfjernelseseffekt
Faktorer, der påvirker virusfjernelseseffekt
Virusfjernelsesfiltreringen kan i væsentlig grad fjerne vira i opløsninger, og dens fjernelseseffekt er relateret til, hvor virusfjernelsesfiltreringen finder sted, proteinkoncentration i fodervæsken, filtreringstryk, opbevaringstid og kryokonservering mv.
1. Hvor virusfjernelsesfiltrering finder sted
Virusfjernelsesfiltrering kan forekomme hvor som helst i nedstrømsrensningen, men den finder normalt sted efter lav pH-virusinaktivering, mellemliggende kromatografitrin eller afsluttende kromatografitrin. Overordnet set er de faktiske filtreringskrav i hele downstream-processen meget afhængige af, hvor i processen virusfiltreringstrinnet befinder sig, da proteinkoncentration, renhed og procesvolumener kan variere.
2. Proteinkoncentration af fodervæsken
Proteinkoncentrationen i prøven vil påvirke strømmen af virusfjernelsesfiltreringen gennem interaktionen mellem foderopløsningen og membranposen. En højere proteinkoncentration vil reducere hastigheden af virusfjernelsesfiltreringsprocessen. Det er også relateret til egenskaberne af selve proteinet og selve membranen. Normalt reduceres produktkoncentrationen under den kontinuerlige fortynding af produktet for at øge kapaciteten og flowhastigheden af virusfjernelsesfiltermembranen.
3. Filtreringstryk
Processen med virusfjernelsesfiltrering skal generelt sikre kontinuerlig filtrering. Fordi trykafbrydelsen kan føre til virusindtrængning. Princippet er: den konvektive effekt af fødevæsken, der strømmer gennem filteret, bevirker, at viruspartiklerne fanges på overfladen af membranen eller fanges i den mindre porestørrelse på grund af molekylærstørrelsesudelukkelse. Når trykket falder, falder strømningshastigheden og konvektionseffekten. Virussen vil undslippe og frigives fra små porer og diffundere til store porer med stor sandsynlighed for at trænge ind.
4. Opbevaringstid og kryokonservering
Nogle proteiner danner aggregater under opbevaringsprocessen, især under kryokonservering. Disse aggregater kan have en indvirkning på virusfjernelsesfiltrering. Derfor skal det vurderes, om der er lang opbevaringsperiode i produktionsprocessen, eller hvornår der er behov for kryokonservering.
